小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 ELISA试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测，7个工作日出结果，提供原始数据！
检测范围：每种的检测范围都有所不同,具体请查看说明书
特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的指标，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月
预期应用：ELISA法检测指标血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中含量或灵敏度。
小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 ELISA试剂盒 操作步骤
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液00μl，余孔分别加标准品或待测样品00μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应20分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加标记抗体工作液 00μl（取μl标记抗体加99μl标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡-2分钟，200μl/每孔，甩干。 产品名中文（英文）酶联免疫吸附测定试剂盒
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同标记抗体工作液） 00μl，37℃，60分钟。
5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡-2分钟，200μl/每孔，甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔显色不明显，即可终止）。
7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后5分钟以内进行检测。
本品用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗HVA抗体的微孔中依次加入标本或标准品、化的抗HVA抗体、HRP标记的亲和素，经过*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的HVA呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。. 酶标仪（建议参考仪器使用说明提前预热）2. 微量加液器及吸头，EP管3. 蒸馏水或去离子水，全新滤纸
 标记抗体的稀释原则：
临用前以标记抗体稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔00μl），实际配制时应多配制0.-0.2ml。如0μl标记抗体加990μl标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则：
临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔00μl），实际配制时应多配制0.-0.2ml。如0μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。 . 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。
2. 标准品（Standard）：2瓶。
3. 样品稀释液（Sample Diluent）：×20ml/瓶。
4. 标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：×0ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：×0ml/瓶。
6. 标记抗体（Biotin-antibody）：×20μl/瓶（：00）
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：×20μl/瓶（：00）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：×0ml/瓶。
9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
0. 终止液（Stop Solution）：×0ml/瓶（2N H2SO4）。
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